Ella全自动微流控免疫分析仪

全自动化

手动设置10-15 min，1 h时获得数据结果。与传统ELISA 3-6 h检测流程，80 min手动设置相比，加快实验数据周转速度。

高灵敏度

采用微体积反应管和高质量ELISA抗体对。多因子检测时，完全独立反应流路，避免了交叉反应。

极佳实验重复性

Ella系统可全程自动完成，所有免疫学反应都发生在卡盒微流通道内，消除了人工操作的误差，实现数据结果的低CV值，高重复性，利于大样本量平行对比和临床样本长时间动态监测。

应用方向

传染病与感染免疫、细胞与基因治疗、神经科学、肿瘤及肿瘤免疫、疾病生物标志物研究

物种

人，小鼠，大鼠，非人灵长类

客户根据不同需求选择Simple Plex 卡盒

全自动微流控免疫检测设计

Ella这种“一键敲击”的全自动免疫检测技术彻底颠覆了传统，创新性将特异性检测抗体包被在微流体玻璃反应管(Glass Nano Reactor，GNR)中，每个GNR内径为70um，长250um，再将GNR嵌入全自动微流体免疫检测管。同时将生物素标记检测抗体，荧光标记链霉亲和素预先密封在检测板上。EllaTM系统可自动取样本，洗涤，取检测抗体杂交，洗涤，取荧光标记链霉亲和素与生物素标记检测抗体结合，最后自动输出3个平行GNR的数据及均值。全程免疫反应和结果检测无需人工参与。

Ella采用双抗夹心的原理，抗体对来自R&D system，具有高亲和力，高特异性的特点。卡盒为全封闭检测空间，能极大地降低噪音。通过Biotin-Streptavidin信号放大系统，荧光信号的高线性范围可达4个log以上。卡盒采用微流控设计，节省珍贵样本的用量。Ella为全自动检测，能实现检测的标准化。

检测只需三步

应用领域

1. 感染性休克炎性生物标志物检测

心肌功能障碍在脓毒症中很常见，但最佳治疗策略尚不清楚。左旋西门丹被认为是一种可能的治疗方法，但在脓毒症(LeoPARDS)试验中，左旋西门丹预防急性器官功能障碍的试验发现，左旋西门丹对减少脓毒性休克中的器官功能不全起作用。英国帝国理工学院圣玛丽医院ICU的研究者评价了左旋西门丹在生化性心功能不全患者中的作用，并观察了其非肌力作用。研究者使用Ella测量了血浆中 5 种炎症生物标志物，以及两种心脏生物标志物，肌钙蛋白I (cTnI) 和脑钠素 N端激素(NT-proBNP)，这些样本是从招募到 LeoPARDS 试验的患者前六天样本中提取。在左旋西门丹组和安慰剂组中，所有测定的炎症生物标志物CCL 2、IL-6、IL-8、IL-10和sTNFr1均呈类似的下降趋势。具体见下列图表。

参考文献：David B. Antcliffe，et al. Levosimendan in septic shock in patients with biochemical evidence of cardiac dysfunction: a subgroup analysis of the LeoPARDS randomised trial. Intensive Care Medicine. October 2019, Volume 45, Issue 10, pp 1392–1400.

2. 研究哮喘2型免疫反应治疗生物标志物

哮喘：哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，导致气短、胸闷和咳嗽。症状会随着时间的推移而波动，并可能在恶化期间恶化并导致呼吸衰竭，这些症状往往是由病毒性上呼吸道感染引起的，或者较少是由于暴露于空气过敏原或空气污染而引起的。哮喘一直被认为是典型的T辅助2(Th2)细胞介导的疾病。

2型免疫型哮喘：内源性哮喘主要是2型免疫型哮喘，其特点是气道和血液嗜酸性粒细胞增多，以及依赖于2型细胞因子IL-5和IL-13的生物标志物。生物制药公司研发了大量IL-5和IL-13抗体，其中IL-5单克隆抗体药物取得了很好的临床效果，IL-13单克隆抗体均在临床II期，III期失利。

本研究中招募了26名住院哮喘患者(9名嗜酸性粒细胞过敏; EA，9名非嗜酸性粒细胞过敏;NEA和8名非嗜酸性粒细胞非过敏性; NN)和9名高海拔健康对照21天进行高原治疗。治疗后，EA患者嗜酸性粒细胞(休眠和活化)和表达CRTH2的CD4+和CD8+ T细胞数量明显减少。高原治疗后，所有哮喘表型中CRTH2+ Tregs显着下降以及ILC2显着降低。在高原治疗21天后，表达CRTH2的ILC2，CD4+和CD8+ T细胞和Treg细胞对外源PGD2的反应减弱。此外，通过CRTH2的PGD2信号传导减少了CRTH2+ Tregs的抑制功能，其在高海拔治疗期间部分正常化。改善的哮喘控制在过敏性哮喘患者中尤为明显，并且与EA患者中CRTH2 + Treg细胞降低相关。在具有高基线水平的哮喘患者的气候治疗期间，血清IL-5和IL-13水平降低。综上，高海拔地区的哮喘治疗减少了2型免疫反应，纠正了CRTH2表达增加而引起的失调。

参考文献：Tadech Boonpiyathad，et al. Impact of High Altitude Therapy on Type‐2 Immune Responses in Asthma Patients.Allergy. 03 July 2019 ,https://doi.org/10.1111/all.13967.

3. 通过Biomarker Panel建立人腹主动脉瘤生长预测评估模型

外科学排名第一的杂志，外科学年鉴(Annals of Surgery)，2019年7月份将刊发牛津大学最新研究成果，利用Ella系统(全自动超敏微流控ELISA系统)，通过检测人体腹主动脉瘤的蛋白质biomarker(circulating proteins)，并结合生理指标(FMD, AAA size)，对人体腹主动脉瘤的生长情况做预测评估。

根据血管外科学会指南(Vascular Surgery SocietalGuidelines)，预测人体腹主动脉瘤(Abdominal Aortic Aneurysms, AAA)生长的方法，在现有文献报道中是一个空白。因预测AAA的生长情况，可以对AAAs监测频率和手术的最佳时机进行多方面的临床管理。所以目前对AAA生长情况的预测评估，仍然是血管外科学领域研究的重点。本文作者利用先前已报道了血流介导的肱动脉扩张直径(Flow-Mediated Dilatation:FMD，系统内皮功能的生理标志物)作为AAA进展的新生物标志物。并同时使用2个变量：FMD和在基线测量的AAA直径，作为未来12个月和24个月的个体患者的腹主动脉瘤生长速度的生理指标。与此同时，作者利用蛋白质Biomarker，即通过Ella系统，检测关键蛋白质Biomarker(circulating proteins:循环蛋白)的变量来改进预测算法。

本文作者利用Ella，验证人体腹主动脉瘤的蛋白质生物标志物Panel。

参考文献：Lee R ,et al.Integrated Physiological and Biochemical Assessments for the Prediction of Growth of Abdominal Aortic Aneurysms in Humans, Ann Surg. 2019 Jul;270(1):e1-e3.

4. 游离PD-L1研究

免疫检查点

PD-L1全称为程序性死亡-配体1(Programmed Cell Death-Ligand1)，是大小为40KD的第一型跨膜蛋白。当细胞程序化死亡受体-1(PD-1)与细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)结合时，可以传导抑制性信号，从而抑制T细胞的活性，使肿瘤细胞成功逃逸T细胞的免疫检测和查杀。近年来，PD-1/PD-L1抑制剂(免疫检查点抑制剂)成为抗肿瘤领域的治疗热点，包括在NSCLC(非小细胞肺癌)、黑色素瘤、肾细胞癌、膀胱癌、尿路上皮癌等多种恶性肿瘤中表现出了临床有效性。

因PD-L1的表达水平与患者使用免疫检查点抑制剂的疗效存在关联，所以检测肿瘤患者体内的PD-L1的表达水平成为评价免疫检查点抑制剂的疗效的关键指标。目前对PD-L1的诊断测试仍使用免疫组织化学(IHC)来评分肿瘤微环境。但肿瘤与肿瘤间的异质性，组织来源的多样性，如细胞学标本，存档标本与新鲜标本，原发部位与转移灶等都会影响PD-L1的测定结果。

血清游离型PD-L1水平与肿瘤一线疗法评价

美国宾夕法尼亚州赫尔希密尔顿医疗中心，以及多所医学研究机构的科学家们使用ProteinSimple的Ella微流控免疫检测系统来检测PD-L1表达水平，评价其水平升高在HER2阳性转移性乳腺癌trastuzumab作为一线疗法临床研究中的意义，并陆续在世界顶级医学杂志JCO(Journal of Clinical Oncology，IF=26.36)上发表文章，以下为文章结果。

Ella微流控免疫检测系统检测PD-L1的优势

• 高灵敏度(2.35pg/ml)
• 宽动态范围(4-5log)
• 全程自动化/标准化
• 内置标准曲线
• 重复性，稳定性，精准性最佳

参考文献

1.Circulating PD-L1 (programmed death-ligand 1) and outcomes in a HER2-positive metastatic breast cancer cohort treated with first-line trastuzumab.

2. Elevated serum activin A and PD-L1 and survival in the CCTG MA.31 phase III trial (trastuzumab vs. lapatinib) in first-line HER2+ metastatic breast cancer.

5. 疫苗接种提高造血干细胞移植患者抗感染免疫

造血干细胞移植(HSCT)后的免疫重建是一个复杂而动态的过程，从几乎完全的免疫抑制状态到预期的完全免疫恢复。特定的疫苗接种指南建议在HSCT后进行再免疫，但关于这一独特人群中疫苗效力的数据很少。新的免疫功能试验可以预测HSCT环境下的疫苗应答。

免疫接种提升HSCT免疫功能研究

由两百年历史的法国最著名医学中心：里昂综合人民医院发起的对自体和同种异体HSCT接受者进行前瞻性、纵向单中心队列研究，以确定病人对5种疫苗(肺炎球菌、乙型肝炎病毒、乙型流感嗜血杆菌、破伤风和白喉)的反应，并与免疫功能指标关联性。建立了一个研究疫苗血清学反应的工作流程，阐述了100例HSCT患者(50例自体和50例异基因)在初次免疫前和免疫后3、12和24个月的功能免疫状况。在每个时间点，‘基本’免疫状态记录(血清学，免疫表型的淋巴细胞亚群)将被评估。(1)脂多糖或金黄色葡萄球菌肠毒素B刺激全血中肿瘤坏死因子α、干扰素的产生和宿主信使RNA的表达，以及(2) 标准的丝裂原(植物血凝素)刺激引起的T淋巴细胞增殖或对记忆抗原的选择。参考间隔将从30名健康志愿者中确定。这一转化研究将提供数据描述HSCT接受者随着时间的推移免疫反应，免疫功能，并映射HSCT受体的免疫功能。

免疫接种及免疫功能分析流程

免疫功能实验

五种疫苗免疫接种

参考文献：VaccHemInf project: protocol for a prospective cohort study of efficacy, safety and characterisation of immune functional response to vaccinations in haematopoietic stem cell transplant recipients，Conrad A, et al. BMJ Open 2019;9:e026093